Реакция непрямой гемолитической агглютинации (РНГА)

Реакция непрямой гемолитической агглютинации (РНГА) относится к серологическим методам исследования. Серология – наука об изучении различных свойств плазмы крови. Если точнее говорить, то серология изучает взаимодействие антител, находящихся в организме человека, с определёнными антигенами. В медицинской клинико-лабораторной диагностики серология является одним из разделов иммунологии.

Основными серологическими методами исследования являются различные реакции. Такие реакции, как правило, делятся на прямые и косвенные. В свою очередь прямые бывают двухкомпонентными – это агглютинация, гемолитическая агглютинация или реакция преципитации. А косвенные реакции в основном трехкомпонентные, к ним относятся реакции торможения гемолитической агглютинации и нейтрализации (микроорганизма и вируса).

Агглютинация представляет собой слипание и выпадения в осадок клеток, имеющих определенный антиген, который вступил во взаимодействие с таким же антигеном. Реакция преципитации помогает определить в организме или исследуемом материале неизвестный антиген путем добавления определенного антитела. В результате при положительном результате выпадает осадок в виде хлопьев.

Такие исследования проводят для определения инфекционного или бактериологического заболевания. К сожалению, такие методы не являются однозначными в диагностики данных групп заболеваний. Поэтому при постановке диагнозов следует учитывать анамнез пациента, клинические проявления заболевания, а также назначать дополнительные подтверждающие методы исследования.

Реакция непрямой гемолитической агглютинации (РНГА) – этот метод специфичен для определения инфекционных заболеваний, вызванных бактериями (например, сальмонеллезов или дизентерии), риккетсиями, простейшими или грибами. Также этот метод эффективен в отношении диагностирования сифилиса.

Принцип метода РНГА

При постановке реакции используются эритроциты (может использоваться латекс), которые имеют на своей стенке определенные антигены. К планшету с эритроцитами добавляется исследуемый материал. Если в нем имеются специфические антитела или белки определяемого возбудителя заболевания, то они вступают в связь с антигенами, слипаются и образуют видимый осадок.

Стандартный набор в основном содержит пустой планшет, эритроциты баранов, которые и имеют чувствительность к антигену выявляемого заболевания. Также в наборе присутствуют эритроциты, не имеющие антигенов. Контроли – положительный и отрицательный и стандартный реактив для разведения сывороток.

Самое главное в постановке реакции – это строгое соблюдение всех этапов. Для начала берут пустой планшет для РНГА, в лунки раскапываются последовательно заранее разведенные исследуемые образцы. В первую и последнюю лунки капают контроли. К сывороткам добавляют эритроциты со специфическими антигенами. Инкубируют планшет 2 часа.

Далее описывают визуальный результат. Он учитывается в крестах. Реакция считается верной только тогда, когда контроли прошли реакцию. Соответственно, в лунке с положительным контролем эритроциты располагаются по всему дну в виде хлопьев («зонтик»). В случае с отрицательным контролем на дне лунки выпадает маленькое четкое кольцо из эритроцитов («пуговка»).

Врачи отмечают, что реакция непрямой гемолитической агглютинации (РНГА) является важным инструментом в диагностике различных заболеваний. Этот метод позволяет выявлять антитела к антигенам, что особенно актуально при инфекционных заболеваниях и аутоиммунных расстройствах. Специалисты подчеркивают, что РНГА обладает высокой чувствительностью и специфичностью, что делает её незаменимой в клинической практике. Однако они также предупреждают о необходимости правильной интерпретации результатов, так как ложноположительные и ложноотрицательные результаты могут привести к ошибкам в диагностике. Врачи рекомендуют использовать РНГА в сочетании с другими методами исследования для более точной оценки состояния пациента.

Реакция агглютинации (РА), Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА) | Микробиология

Учет результатов

Результат учитывается по интенсивности осадка из эритроцитов в лунке.

• «-» отрицательный результат, как отрицательный контрольный образец, в виде плотного кольца на дне без какой-либо зернистости.
• «+» слабая интенсивность реакции, кольцо на дне в виде «пуговки», но при этом видны отдельные отложения эритроцитов. Результат описывается как «сомнительный». Обязательная пересдачи крови через 2 недели.
• «++» средняя интенсивность прошедшей реакции. Образовавшееся кольцо на дне лунки достаточно широкое с просветом в центре. Результат трактуется как слабо положительный.
• «+++» интенсивная реакция. В лунке эритроциты занимают всю поверхность, выпадают в виде «зонтиков». То есть с тонким кольцом по периферии. Результат оценивается как положительный.
• «++++» резкая интенсивность реакции. Вся лунка равномерно заполнена зернистыми выпадениями эритроцитов, иногда может быть в виде «зонтика». Также результат считается положительным или резко положительным.

Реакция может быть ложноположительной при протекании в организме человека тяжелых аутоиммунных заболеваний. Поэтому, если при пересдаче анализа реакция дает перекрест и результат отчитывается как ложноположительный, незамедлительно нужно обратиться к врачу для выяснения причины данной реакции.

Иногда этот метод принимают для подтверждения другого метода диагностики, основанного также на связывании антиген-антитело, называемого иммуноферментный анализ.

Реакция непрямой гемолитической агглютинации (РНГА) вызывает интерес у специалистов в области медицины и лабораторной диагностики. Многие отмечают её высокую чувствительность и специфичность при выявлении различных инфекционных заболеваний, а также при определении группы крови и резус-фактора. Врачам нравится, что метод позволяет быстро получить результаты, что особенно важно в экстренных ситуациях. Однако некоторые эксперты подчеркивают необходимость тщательной интерпретации полученных данных, так как ложноположительные или ложноотрицательные результаты могут привести к неправильной диагностике. В целом, РНГА считается надежным инструментом, который, при правильном использовании, значительно облегчает процесс диагностики и лечения пациентов.

Подготовка к анализу

Чтобы не допустить ложноположительных результатов, к анализу нужно подготовиться заранее. Забор крови на данный анализ производится строго натощак и без употребления утром какой-либо жидкости. Нужно воздержаться от курения, хотя бы за час до сдачи анализа. Алкогольные напитки стоит исключить из рациона как минимум за сутки до анализа. Кровь на РНГА забирается из вены.

В настоящее время реакцию непрямой (пассивной) гемолитической агглютинации очень широко используют в медицинской лабораторной диагностике. Эта методика впервые была протестирована еще в 1965 году. И до сегодняшнего дня очень востребована. Она дает возможность не только определить, протекает ли в данный момент инфекционное заболевание у человека, но и на какой стадии оно находится.

Используют РНГА чаще всего для скрининга населения на наличие инфекционных заболеваний и для подтверждения положительных результатов, например, на сифилис. Основано это на том, что тест считается достаточно чувствительным и эффективным. Но при этом реакция проста в постановке и не требует много времени, результат можно получить уже в день сдачи крови.

Реакция непрямой (или пассивной) гемагглютинации (РНГА/РПГА)

Вопрос-ответ

Что такое реакция РНГА?

РНГА (реакция непосредственной гемагглютинации) — это тип иммунологической реакции, при которой происходит связывание антител с поверхностью эритроцитов, что приводит к образованию сгустков.

Реакция непрямой гемагглютинации

Что такое реакция непрямой агглютинации?

РЕАКЦИЯ НЕПРЯМОЙ (ПАССИВНОЙ) ГЕМАГГЛЮТИНАЦИИ (РНГА, РПГА). Под непрямой, или пассивной, агглютинацией понимают реакцию, в которой антитела взаимодействуют с антигенами, предварительно адсорбированными на инертных частицах (латекс, целлюлоза, полистерол, оксид бария и др.).

Что такое реакция РТГА?

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) основана на способности антител, содержащихся в сыворотке крови (экстрактах желтка), нейтрализовать гомологичный антиген вируса, что приводит к потере его агглютинирующей активности и визуально проявляется оседанием введенных в реакцию в качестве индикаторной системы куриных.

Что такое РГА в микробиологии?

Реакция пассивной гемагглютинации – это лабораторное исследование, при котором определяются антитела к возбудителю сифилиса. Данный анализ является чувствительным и используется как подтверждающий тест.

Советы

СОВЕТ №1

Изучите основные принципы работы метода РНГА, чтобы лучше понимать, как он применяется в диагностике заболеваний. Понимание механизма агглютинации поможет вам интерпретировать результаты тестов более точно.

СОВЕТ №2

Обратите внимание на качество используемых реагентов и образцов. Для получения надежных результатов важно, чтобы все компоненты были свежими и правильно хранились, так как это может существенно повлиять на точность теста.

СОВЕТ №3

Регулярно обновляйте свои знания о новых методах и усовершенствованиях в области РНГА. Научные исследования и клинические рекомендации постоянно развиваются, и быть в курсе последних достижений поможет вам улучшить качество диагностики.

СОВЕТ №4

Практикуйте навыки интерпретации результатов РНГА на реальных примерах. Это поможет вам лучше справляться с различными клиническими ситуациями и принимать обоснованные решения на основе полученных данных.